%0 Report
%1 lenz2003strategien
%A Lenz, C.
%A Kruft, V.
%A Herberg, F. W.
%A Zeilinger, C.
%D 2003
%J Applied Biosystems technical note
%K herberg myown tr
%T Neue Strategien zur Analyse posttranslationaler Proteinmodifikationen auf einem hybriden Triple Quadrupol -Linearen Ionenfallen Massenspektrometer
%X Die MS-Analyse posttranslationaler Proteinmodifikationen (PTMs) beruht traditionell auf einer Kombination verschiedener Methoden und Geräte. So können z.B. phosphorylierte Verdau-peptide durch Vorläuferionenexperimente auf QqQ-Massen-spektrometern selektiv detektiert und anschließend mittels Ionenfallen- oder QqToF-MS ihre Sequenz analysiert werden. Durch die Einführung hybrider Triple Quadrupol-Linearer Ionenfallen Massenspektrometerassen sich diese beiden Analyseschritte der selektiven Detektion und der Sequenzierung durch MS/MS und MS/MS/MS innerhalb desselben Experiments durchführen. Da die Q TRAP-Systeme volle QqQ-Funktionalität besitzen, lassen sich durch Multiple Reaction Monitoring (MRM)-Experimente zudem quantitative Informationen über die detektierten Modifikationen erhalten. Dies soll im folgenden am Beispiel der cAMP-dependent protein kinase aus Maus demonstriert werden. Nach Expression dieses Proteins in E.coli konnten Herberg et al. 1993 durch MS-Analyse des intakten Proteins mehrere Isoenzyme mit bis zu vierfacher Phosphorylierung nachweisen. Die Phosphorylierungsstellen wurden durch Yonemoto et al. per 31P-Markierung und Edman-Sequenzierung bestimmt. Eine umfassende MS-Analyse der Phosphorylierungsstellen erfolgte 2001 durch Schlosser et al.